① 手機克隆怎麼用
使用手機克隆，只需較短時間，便可將舊手機上的基礎數據（如聯系人、日歷、圖片、視頻等）遷移到新手機，實現新舊手機無縫銜接。
一、從華為或其他安卓設備遷移數據
1、在新手機上，進入手機克隆應用，或進入設置 > 系統和更新 > 手機克隆，點擊這是新設備，選擇華為或其他安卓。
2、根據界面提示，在舊設備下載安裝手機克隆。
3、在舊設備上，進入手機克隆應用，點擊這是舊設備，根據界面提示，通過掃碼或手動連接的方式，將舊設備與新手機建立連接。
4、在舊設備上，選擇要克隆的數據，點擊開始遷移完成數據克隆。
提示：手機克隆支持的安卓版本可在應用市場搜索手機克隆，並進入應用詳情頁面查看。
二、從 iPhone 遷移數據
1、在新手機上，進入手機克隆應用，或進入設置 > 系統和更新 > 手機克隆，點擊這是新設備，選擇 iPhone。
2、根據屏幕提示，在舊設備下載安裝手機克隆。
3、在舊設備上，進入手機克隆應用，點擊這是舊設備，根據界面提示，通過掃碼或手動連接的方式，將舊設備與新手機建立連接。
4、在舊設備上，選擇要克隆的數據，並根據界面提示完成數據克隆。
提示：手機克隆支持的 iOS 版本可在 App Store 中搜索手機克隆，並進入應用詳情頁面查看。
② 掌握這些技術，基因克隆不是夢
在過去的幾十年裡,分子生物學家已經開發許多可以用來更快地構建目的DNA序列結構的技術來簡化和規范克隆過程。
你熟悉這些克隆技術嗎?下面我們來看看這些技術的特點。
1, 限制性酶切與連接法
長期以來，限制酶切與連接法被認為是一種傳統的克隆方法。這個方法便宜靈活，可以分為兩步過程：酶切和連接。限制性內切酶能特異地結合於一段被稱為限制性酶識別序列的DNA片段上並切割雙鏈DNA。DNA連接酶催化兩雙鏈DNA片段相鄰的5』-磷酸和3』-羥基間形成磷酸二酯鍵。在分子克隆中，最有用的DNA連接酶是來自T4噬菌體的DNA 連接酶：T4 DNA連接酶。這個方法原理較簡單，我不做過多介紹。
2, Gateway 克隆技術
Gateway克隆發明於九十年代末，由walhout[2]等提出，一種通用性的克隆方法，與傳統克隆方法相比，Gateway技術的優點是可以不必考慮目的DNA 是否有合適的酶切位點，也不必進行繁瑣而費時費力的酶切和連接反應，就可以按確定的方向和讀碼框快速而准確地將目的基因克隆到各種與Gateway技術兼容的目的載體上。
它利用λ噬菌體與大腸桿菌染色體之間發生的位點特異性的重組整合與切除反應，即LR和BP。BP反應是利用一個attB DNA片段或表達克隆和一個attP供體載體之間的重組反應，創建一個入門克隆。LR 反應是一個attR入門克隆和一個attR目的載體之間的重組反應。LR反應用來在平行的反應中轉移目的序列到一個或多個目的載體。重組位點attB、attP、attL和attR 由噬菌體λ和大腸桿菌編碼的酶合劑特異識別。
Invitrogen公司開發了包括運用於原核、酵母、昆蟲和哺乳動物等不同宿主的表達載體，大大提高了Gateway技術的適用性。Gateway技術已被廣泛用於高通量載體的構建
3, Gibson Assembly
傳統的限制性內切酶克隆技術，會在兩個片段的結合位置上形成一道「疤」或「縫」，這種瑕疵可能會對DNA片段的行為產生微妙的影響。這一點特別令合成生物學家頭疼，因為他們常常要將啟動子和終止子這樣的DNA片段轉變為可預測的獨立元件。Now我給大家介紹一下Gibson Assembly，一種無縫克隆方法。
Gibson組裝最早由Daniel Gibson博士和他的同事J. Craig Venter在2009年提出[3]。Gibson組裝非常適合用於拼接多個線性DNA片段，當然也適合將目的DNA插入載體中。如下圖所示，首先，需要在DNA片段的末端加上同源片段（通過PCR法加上）；然後，將這些DNA片段和一種master mix（含有三種酶）混合孵育一個小時就可以了。這種master mix含有三種不同類型的酶：1）一種外切酶，從5』端開始對DNA進行消化，產生長的黏性末端，這樣便於與另外的同源末端進行配對結合。2）一種聚合酶，用於修補gap。3）一種DNA連接酶，實現無痕拼接，形成完整的DNA分子。
這個系統最厲害的是，這三種酶都可以在同一個溫度下很好的發揮功能，所以整個反應在50攝氏度條件下一個小時就可以完成。一小時後，樣品可以直接用於轉化。當然Gibson Assembly也有缺陷，這一過程並沒有生成限制性酶切位點，因而不方便將拼接片段轉移到另一個載體上。建議最好是事先設計好限制性位點。需要注意的是，如果一次性組裝超過5個片段，成功率會大大降低。
4, Golden Gate 拼裝法
Golden Gate 拼裝法主要是依賴於一種II型限制性內切酶(ⅡS 型酶，如 BsaⅠ和 AarⅠ)，這種酶能夠在其DNA 識別處的相鄰位置進行剪切[4]。如果人為設計識別位點不同的相鄰序列，就可利用同種限制酶產生不同的粘性末端，從而一次組裝多個片段，這克服了傳統多片段組裝時限制酶種類的限制。
具體到原理：一般的內切酶分為三種，通常用的是2類的酶，識別特定的迴文序列，並從中切開。而golden gate一般用的是3類酶，一般以bsmb 1，Bsa1, Bbs1這三種酶，識別特定的序列，並在特定序列以後隔幾個任意的鹼基切開，這樣子就可以克服2類酶必須要迴文序列才能用的缺點，實現片段的連接。
另外，要說的是連接部分，傳統的連接酶是T4用的比較多，T4可以連接黏性末端跟平末端，而golden gate里用的是T7，它的特點是只能實現連接黏性末端。因為T7的這一特性，所以在連接的時候可以把片段跟切好的載體混到一種特殊的buffer里，在這里內切酶跟T7都可以保持比較高的活性，通過溫度的調節，實現克隆的構建。因為用的是T7，所以不用擔心PCR片段自連降低克隆效率，又因為是用的三類酶，可以通過黏性末端的設計，可以一種酶切多個片段，又不用擔心這幾個片段之間的亂連，來達到分子克隆的目的[5]。
5, TOPO克隆(TA克隆)
TOPO克隆使用DNA拓撲異構酶I，該酶同時具有限制酶和連接酶的特性。這種酶在復制期間切割並重新連接DNA，整個克隆過程可以在室溫下完成，且僅需5分鍾。TOPO克隆不需使用含限制酶序列的引物，不需在PCR擴增產物上加接頭，即可直接進行克隆。
Topo TA克隆原理與TA克隆一樣，唯一不同的是TA克隆用的是T4連接酶把PCR片斷連接到T載體上，而Topo TA Cloning用的是DNA 拓撲異構酶I。
pCR-TOPO 載體也是一種 T 載體，只是在其 3』末端的突出 T 上共價結合了一個拓撲異構酶 Ⅰ ，當帶 3′ 末端的突出 A 的 PCR 產物與該 T 載體互補配對時，拓撲異構酶 Ⅰ 就將該缺口連接起來。
自沃森，克里克在1953年發現DNA雙螺旋結構不過60餘年，如今的DNA克隆技術卻已發展到如此的程度。合成生物學正處在高速發展時期，這些進步技術的進步必將推動生物革命浪潮的到來。你都掌握了嗎？
Reference
[1] 李華琴,林陳水,張文倩. 不依賴連接反應的高通量克隆方法. 氨基酸和生物資源.2013,35(4):43-46
[2] Walhout A J M, Temple G F, Brasch M A, et al. GATEWAY recombinational cloning: Application to the cloning of large numbers of open reading frames or ORFeomes[J]. Methods in enzymology, 2000, 328: 575-IN7.
[3] Gibson, D.G., et al. (2009) Nat. Methods 6, 343-345.
[4] Morbitzer R, Elsaesser J, Hausner J, et al. Assembly of custom TALE-type DNA binding domains by molar cloning[J]. Nucleic acids research, 2011, 39(13): 5790-5799.
[5] https://www.hu.com/question/49568914/answer/116646832